programı önceden çalıştırdığınızda dosyayı kapatmadınız mı ?
Dosya açarken "with" ile açın.
Örnek:

with open("dosya.txt","r") as dosya:

+ olarak o dosyayı açtığınız her işlemi sonlandırın(pc yi yeniden başlatmak en güzel çözüm)