Söyleyebilecek çok şey var, çok genel bir hata çünkü. IIS'i resetleyip tekrar dene.
Hala çalışmıyorsa log dosyana bir bak. Eğer aspnet_wp.exe ile alakalı ise NETWORK SERVICE ile alakalıdır veya aspnet_regiis.exe ile alakalıdır. Register olmamış olabilir.
Web.Config'te bir değişiklik yaptın mı? App_Poll'dan kaynaklı da olabilir.