images klasörüne yazma izni verdiğinden emin olmalısın ve en önemlisi MapPath içine sadece klasörün ismini yazmışsın, yükleyeceğin dosya veya resmin ismini ve uzantısınıda yazmalısın.

Örneğin;
Upload.Save Server.MapPath("\images\"&Upload.Form("dosya")&"") şeklinde